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顯微鏡玻片标本的(de)制作

文章(zhāng)出處: 人氣:發表時間:2022-11-01 13:19

制作玻片标本對認識生物體的(de)形态結構具有重要意義。玻片标本有臨時玻片标本(如(rú)塗片、壓片、臨時裝片)和(hé)永久玻片标本(如(rú)永久裝片、切片)。


1.塗片法


塗片法是将材料均勻地(dì)塗布在載玻片上的(de)一(yī)種制片方法。


塗片材料有單細胞生物、小型藻類、血液、細菌培養液、動植物的(de)疏松組織、精巢、花藥等。


塗片時應注意:(1)載玻片必須清潔。(2)載玻片要持平。(3)塗層須均勻。塗抹液滴在載玻片中間偏右,用解剖刀刃或牙簽等塗勻。(4)塗層要薄。用另一(yī)載玻片作推片,沿滴有塗抹液的(de)載玻片面(二載玻片夾角應為(wèi)30°~45°)由右向左輕輕推動,塗成均勻一(yī)薄層。(5)固定。如(rú)需固定可(kě)用化學(xué)固定劑或幹燥法(細菌)固定。(6)染色。細菌用亞甲基藍,血液用瑞氏染液。染色液要蓋住全部塗面。(7)沖洗。用吸水紙吸幹或烤幹。(8)封片。長(cháng)期保存用加拿大的(de)樹膠片。


2.壓片法


壓片法是将生物材料置于載玻片和(hé)蓋片之間,施加一(yī)定壓力,将組織細胞壓散的(de)一(yī)種制片方法。


壓片法的(de)一(yī)般過程:


(1)取材。觀察細胞分裂,應選取細胞分裂旺盛、新鮮的(de)組織細胞為(wèi)材料。如(rú)根尖、莖尖分生組織、骨髓細胞、花藥(花粉母細胞)。精巢(精母細胞)等。


(2)固定。材料固定可(kě)根據需要而定,取材後立即壓片觀察,可(kě)不作單獨固定處理(lǐ)(與染色同步進行);取材後不立即視(shì)察,可(kě)将材料用固定液(一(yī)般用醋酸酒精固定液)固定。固定2~24小時(因材料而異)後用95%乙醇清洗,保存于70%乙醇中,備用。


(3)離(lí)析。對細胞不易散開材料用水解分離(lí)液(如(rú)1N HCl或鹽酸一(yī)酒精液)處理(lǐ),一(yī)般處理(lǐ)6~20min,解離(lí)後經水漂洗後方能染色。


(4)染色。染色劑種類很多。觀察染色體常用醋酸洋紅(hóng)染色液染色。


(5)壓片。将材料放在載玻片上,加一(yī)滴清水或染液,蓋上蓋玻片用拇指輕輕壓片。


(6)觀察。壓片後,即可(kě)在顯微鏡下觀察。


3.裝片法


裝片法是将生物材料采取整體封固制成玻片标本的(de)方法,用此法可(kě)制成臨時或永久裝片。


裝片材料有:微小生物如(rú)衣藻、水綿、變形蟲、水螅,植物的(de)葉表皮;昆蟲的(de)翅、足、口器,人的(de)口腔上皮細胞等。


裝片法制作時應注意:


(1)手持載玻片時,應注意持平,或放在平台上。滴水時水量要适當,以恰好被蓋玻片蓋滿為(wèi)度。(2)應将材料用解剖針或鑷子(zǐ)展開不使重疊,展平在同一(yī)平面上。


(3)放蓋玻片時,從一(yī)側慢慢蓋在水滴上,防止出現氣泡。


(4)染色時,将一(yī)滴染色液滴在蓋玻片的(de)一(yī)側,用吸水紙從另一(yī)側吸引,使蓋玻片下的(de)标本均勻着色。着色後,用同樣的(de)方法,滴一(yī)滴清水,把染色液吸出後,在顯微鏡下觀察。


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